細胞轉染是如何分類的？

細胞轉染是指將外源性基因導入到細胞內的技術。那你知道細胞轉染是如何分類的嗎？讓我們一起來看看吧！

一、根據導入時間長短進行分類

根據導入的核酸存在于宿主細胞的時間長短，可以分為瞬時轉染和穩(wěn)定轉染。

瞬時轉染（transient transfection）：指將構建好的質粒通過某種方式導入到哺乳動物細胞內，該質粒上的外源基因不整合到細胞自身的基因組上。細胞中瞬時轉染的外源基因表達時間有限，通常僅持續(xù)幾天，直到外源基因在細胞分裂過程中因各種因素丟失為止。多用于啟動子和其他調控元件的分析。目前，由于各種轉染試劑的發(fā)明，哺乳動物細胞的瞬時轉染已經用于生產具有適當折疊和翻譯后修飾的重組蛋白。

穩(wěn)定轉染（Stable transfected）：外源DNA整合到細胞基因組中或作為附加體質粒保留在細胞中。與瞬時轉染不同，穩(wěn)定轉染能夠整合到宿主基因組，因此轉染細胞及其子代細胞的基因組中會同時保留轉染的DNA。由于穩(wěn)轉效率較低，因此選用有效地轉染策略和篩選方法很重要。

二、根據轉染方式進行分類

根據轉染方式可以分為化學，生物，物理方法。細胞由帶負電荷的磷脂雙分子層構成，這對大分子物質來說是個不可透過的屏障，比如DNA和RNA的磷酸骨架，其也帶負電荷。為了使核酸穿過細胞膜，研究人員開發(fā)了多種技術，大致分為三類：

化學方法：利用載體分子包被核酸使其呈現(xiàn)中性電荷或正電荷。如陽離子脂質體方法、磷酸鈣共沉淀法、其他陽離子物質介導等技術。

生物方法：利用基因工程病毒轉染非病毒基因到細胞中。現(xiàn)在比較多見的是各種病毒介導的轉染技術。

物理方法：在細胞膜表面產生一個瞬時的孔從而導入DNA。如電穿孔法、顯微注射法。

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