在正常細胞中,磷脂酰絲氨酸(PS)位于細胞膜內側;細胞凋亡早期,PS會從細胞膜胞質外翻到細胞膜外側。Annexin V (膜聯蛋白V)是一種Ca2+ 依賴性磷脂結合蛋白,可與外翻的PS特異性結合,因此Annexin V 常作為檢測細胞早期凋亡的靈敏指標之一。碘化丙啶(Propidium Iodide, PI) 染色液是一種不能穿透細胞膜的紅色核酸染料,可對凋亡晚期細胞及壞死細胞染色。
Annexin V 經熒光素標記后作為熒光探針,如Annexin V-FITC ,與PI聯合(凱基貨號:KGA107)染色后,正常細胞基本無熒光(Annexin V-/PI-),早期凋亡細胞呈綠色熒光(Annexin V+/PI-),晚期凋亡細胞及壞死細胞則呈綠色和紅色熒光(Annexin V+/PI+)。借助流式細胞術即可檢測細胞的凋亡情況。此外,除了用FITC標記Annexin V 之外,也可以用EGFP、PE、APC、mCherry等作為熒光探針,也可以用7-AAD來替代PI作為核酸染料。