Ezb DNA/RNA/組織提取試劑盒的五種使用方法

　　Ezb DNA/RNA/組織提取試劑盒提供了一種簡(jiǎn)單、可靠、快速的方法可以從細(xì)胞和容易研磨的動(dòng)物組織中提取高質(zhì)量的RNA，為一些提取困難的標(biāo)本(例如脂肪組織)提供了很好的解決方案。純化的RNA可以隨時(shí)使用，非常適合對(duì)低量DNA污染敏感的下游應(yīng)用，如實(shí)時(shí)熒光定量PCR。不需要通過(guò)氯仿分層，只需五步即可從各種組織中快速提取高質(zhì)量的RNA，安全無(wú)毒，環(huán)保健康。
 

　　Ezb DNA/RNA/組織提取試劑盒的五種使用方法：
 

　　一.CTAB法
 

　　CTAB法即十六烷基三乙基澳化按法，CTAB是一種陽(yáng)離子去污劑，它能與核酸形成復(fù)合物，這些復(fù)合物在低鹽溶液中會(huì)因溶解度的降低而沉淀，而在高鹽溶液中可解離，從而使DNA和多糖分開(kāi)，再用乙醇沉淀DNA除去CTAB。在該法中使用的聚維酮(PVP)與多酚結(jié)合形成復(fù)合物，從而可有效避免多酚類化合物影響DNA降解。
 

　　二.SDS法
 

　　相比于CTAB，SDS法更加方便簡(jiǎn)單。近年來(lái)科研者們提出了利用SDSTris-Cl-EDTA直接裂解細(xì)胞使其釋放出DNA的方法，后續(xù)的DNA純化過(guò)程中通常采用酚/氯仿處理，但對(duì)于植物DNA純化不是一個(gè)很好的選擇，因?yàn)榉拥氖褂每山档虳NA的提取效率和純度。實(shí)驗(yàn)證明，若采用較大的離心力和較長(zhǎng)的離心時(shí)間，然后用氯仿一異戊醇代替酚來(lái)去除變性蛋白質(zhì)，可以克服由于酚的摻入及殘留對(duì)以后酶切帶來(lái)的困難。
 

　　三.氯化節(jié)法
 

　　氯化節(jié)法的提取獲得率較高。原因可能為氯化節(jié)不僅與植物細(xì)胞壁上的多糖經(jīng)基反應(yīng)生成醚，而且與細(xì)胞液中多糖物質(zhì)反應(yīng)破壞糖鏈，有利于DNA的釋放和提純。
 

　　四.高鹽低pH法
 

　　高鹽低pH法是指以無(wú)機(jī)鹽和異丙烯為提純?cè)噭┨崛NA的方法。通常采用的無(wú)機(jī)鹽為低pH的醋酸鉀，用來(lái)沉淀蛋白質(zhì)。該方法方便省時(shí)，所需樣品量少。
 

　　五.果膠酶法
 

　　利用果膠酶對(duì)植物破碎細(xì)胞進(jìn)行抽提的一種技術(shù)。